摘要: |
构建成含有编码霍乱毒素B亚单位(CTB)和产气荚膜梭菌α毒素(CPA)第70~370 位氨基酸的融合基因CTB-CPA,并在大肠杆菌中获得表达.经限制性内切酶鉴定和核苷酸序列分析表明,CPA 基因在重组质粒中与CTB 基因的连接向位是正确的,位于CTB 基因的下游并与CTB 基因处于同一阅读框架.重组菌株BL21(DE3)(pECTB-CPA)经IPTG 诱导后,其表达产物经SDS-PAGE和Western-blot 检测表明,重组菌株可以表达CTB-CPA 融合蛋白.表达的产物以包涵体的形式存在,可分别被抗CT和A型产气荚膜梭菌抗毒素识别,表达量占菌体总蛋白的22.7%.用表达产物免疫小鼠后,所产生的对A型产气荚膜梭菌毒素攻击的免疫保护力高于用单独的A型产气荚膜梭菌类毒素免疫的小鼠所产生的免疫力,证明所表达的融合蛋白中CTB起到免疫佐剂的作用,增强CPA的免疫原性. |
关键词: CTB-CPA融合基因、融合蛋白、表达、免疫原性、A型产气荚膜梭菌 |
DOI: |
|
基金项目: |
|
Fusion of Cholera Toxin B Subunit Gene to Clostridium perfringens Alpha-Toxin gene, Expression and immunogenicity of expressed products against Clostridium perfringens type A toxin |
蒋玉文,杨京岚,许崇波,朱平,龚人雄 |
() |
Abstract: |
|
Key words: |